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豬雌激素受體基因單體型的分離鑒定方法

時(shí)間:2026-04-07    作者:admin 點(diǎn)擊: ( 0 ) 次

【摘要】 本發(fā)明涉及一種豬雌激素受體基因單體型的分 離鑒定方法,屬于家畜分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。方法的步驟包括, 提取豬的基因組DNA,豬雌激素受體基因的PCR聚合酶鏈?zhǔn)?反應(yīng)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物的多態(tài)性檢測(cè),單體型的構(gòu)建及其與豬繁 殖性狀的相關(guān)性分析。本發(fā)明的特征是分離鑒定出一個(gè)新的豬 雌激素受體基因的單體型H121。本發(fā)明利用豬雌激素受體基 因的單體型與豬繁殖性狀顯著相關(guān)的特性,為豬的標(biāo)記輔助選 種和選配提供了新的分子標(biāo)記方法。 數(shù)據(jù)由馬 克 數(shù) 據(jù)整理 【專利類型】發(fā)明申請(qǐng) 【申請(qǐng)人】上海交通大學(xué) 【申請(qǐng)人類型】學(xué)校 【申請(qǐng)人地址】200240上海市閔行區(qū)東川路800號(hào) 【申請(qǐng)人地區(qū)】中國(guó) 【申請(qǐng)人城市】上海市 【申請(qǐng)人區(qū)縣】閔行區(qū) 【申請(qǐng)?zhí)枴緾N200610029142.6 【申請(qǐng)日】2006-07-20 【申請(qǐng)年份】2006 【公開公告號(hào)】CN1900310A 【公開公告日】2007-01-24 【公開公告年份】2007 【IPC分類號(hào)】C12Q1/68 【發(fā)明人】潘玉春; 王起山; 于丹丹; 李婧; 白春艷 【主權(quán)項(xiàng)內(nèi)容】1、一種豬雌激素受體基因單體型的分離鑒定方法,其特征在于包括如下步驟: 1)采集豬耳組織,利用常規(guī)的苯酚/氯仿抽提方法提取基因組DNA; 2)針對(duì)豬雌激素受體基因的Pvu?II單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)C/T,設(shè)計(jì)雌激素受體 基因特異性引物,進(jìn)行PCR反應(yīng),得到擴(kuò)增產(chǎn)物1;其中,所述的基因特異 性引物具有5’-CCTGTTTTTACAGTGACTTTTACAGAG-3’和 5’-CACTTCGAGGGTCAGTCCAATTAG-3’的序列,所述的擴(kuò)增產(chǎn)物1長(zhǎng)度 為100~2000bp,且含有豬雌激素受體基因的Pvu?II單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)C/T; 3)針對(duì)豬雌激素受體基因的Ava?I單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)C/T和MspA1I單核苷 酸多態(tài)性位點(diǎn)A/G設(shè)計(jì)豬雌激素受體基因特異性引物,進(jìn)行PCR反應(yīng),得 到擴(kuò)增產(chǎn)物2;其中,所述的基因特異性引物具有 5’-CCCTCTATGACCTGCTGCTG-3’和5’-GGAAGTTCTCCGCCTCCGC-3’ 的序列,所述的擴(kuò)增產(chǎn)物2長(zhǎng)度為100~2000bp,且含有豬雌激素受體基因 的Ava?I單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)C/T和MspA1I單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)A/G; 4)檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物1的Pvu?II單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)C/T和擴(kuò)增產(chǎn)物2的Ava?I單 核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)C/T和MspA1I單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)A/G的多態(tài)性; 5)構(gòu)建單體型,針對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物的多態(tài)性用統(tǒng)計(jì)分析的方法共分離鑒定出4種單 體型H121,H211,H111,H221; 6)通過偏回歸分析方法確定與豬繁殖性狀相關(guān)的單體型,其中,單體型H121 與初產(chǎn)總仔數(shù)顯著正相關(guān),攜帶有上述單體型H121的個(gè)體初產(chǎn)總仔數(shù)性狀 顯著優(yōu)于含有其它單體型的個(gè)體; 其中所述的單體型H121在Pvu?II單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)C/T、Ava?I單核苷 酸多態(tài)性位點(diǎn)C/T和MspA1I單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)A/G分別為C、T、G。 【當(dāng)前權(quán)利人】上海交通大學(xué) 【當(dāng)前專利權(quán)人地址】上海市閔行區(qū)東川路800號(hào) 【統(tǒng)一社會(huì)信用代碼】1210000042500615X0 【被引證次數(shù)】1 【被他引次數(shù)】1.0 【家族被引證次數(shù)】1

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