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一種鑒別等位基因類型的方法

時(shí)間:2026-04-12    作者:admin 點(diǎn)擊: ( 0 ) 次

【摘要】 本發(fā)明公開了一種鑒別等位基因的方法。該方法 是以待測(cè)樣品的DNA為模板,用待檢測(cè)目的基因的一個(gè)或一 個(gè)以上突變位點(diǎn)對(duì)應(yīng)的等位基因的引物組和不具有5′→3′ 外切核酸酶活性的DNA聚合酶,進(jìn)行多重PCR擴(kuò)增包括突變 位點(diǎn)在內(nèi)的待測(cè)目的基因的等位基因片段,將得到的多重PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物與通用芯片雜交,根據(jù)雜交結(jié)果確定是哪種等位基 因;所述引物組包括一種通用引物,和用于擴(kuò)增每種目的基因 的每個(gè)突變位點(diǎn)對(duì)應(yīng)的兩種等位基因特異性引物和一種共用 引物;所有的等位基因特異性引物中每種引物的5′端均連接 有不同的Tag序列;所述通用芯片包括若干種Tag探針,所述 Tag探針與所述Tag序列相同,其中,每一種Tag探針只與多 重PCR產(chǎn)生的互補(bǔ)序列雜交結(jié)合。 【專利類型】發(fā)明申請(qǐng) 【申請(qǐng)人】博奧生物有限公司; 清華大學(xué) 【申請(qǐng)人類型】企業(yè),學(xué)校 【申請(qǐng)人地址】102206北京市昌平區(qū)生命科學(xué)園路18號(hào) 【申請(qǐng)人地區(qū)】中國(guó) 【申請(qǐng)人城市】北京市 【申請(qǐng)人區(qū)縣】昌平區(qū) 【申請(qǐng)?zhí)枴緾N200610089526.7 【申請(qǐng)日】2006-06-30 【申請(qǐng)年份】2006 【公開公告號(hào)】CN1896284A 【公開公告日】2007-01-17 【公開公告年份】2007 【授權(quán)公告號(hào)】CN1896284B 【授權(quán)公告日】2013-09-11 【授權(quán)公告年份】2013.0 【IPC分類號(hào)】C12Q1/68 【發(fā)明人】李彩霞; 高華方; 劉湘; 蔡斌; 張地; 程京 【主權(quán)項(xiàng)內(nèi)容】1、一種鑒別等位基因類型的方法,是以待測(cè)樣品的基因組DNA為模板,用待 檢測(cè)目的基因的一個(gè)或一個(gè)以上突變位點(diǎn)對(duì)應(yīng)的等位基因的引物組和不具有 5′→3′外切核酸酶活性的DNA聚合酶,進(jìn)行多重PCR擴(kuò)增包括突變位點(diǎn)在內(nèi)的待 測(cè)目的基因的等位基因片段,將得到的多重PCR擴(kuò)增產(chǎn)物與通用芯片雜交,根據(jù) 雜交結(jié)果確定是哪種等位基因; 所述引物組包括一種通用引物,和用于擴(kuò)增每種目的基因的每個(gè)突變位點(diǎn)對(duì) 應(yīng)的兩種等位基因特異性引物和一種共用引物;每種等位基因特異性引物的5′端 均連接有不同的Tag序列; 所述Tag序列可以和所述多重PCR產(chǎn)物具有的互補(bǔ)Tag序列雜交,所有的Tag 序列的Tm值之差小于等于5℃,相互之間以及與所有的引物之間沒有交叉雜交, 并且無(wú)發(fā)夾結(jié)構(gòu),與含有所述目的基因的物種的基因組的同源性較低; 所述通用芯片包括若干種Tag探針,所述Tag探針與所述Tag序列一一對(duì)應(yīng), 一種Tag探針含有只與其相對(duì)應(yīng)的Tag序列相同的寡核苷酸序列;其中,每一種 Tag探針可以與多重PCR反應(yīng)產(chǎn)生的互補(bǔ)的序列雜交。 【當(dāng)前權(quán)利人】北京博奧晶典生物技術(shù)有限公司; 清華大學(xué) 【當(dāng)前專利權(quán)人地址】北京市大興區(qū)經(jīng)濟(jì)開發(fā)區(qū)科創(chuàng)六街88號(hào)院生物醫(yī)藥園C座; 北京市海淀區(qū)清華園 【專利權(quán)人類型】公立 【統(tǒng)一社會(huì)信用代碼】12100000400000624D 【引證次數(shù)】3.0 【被引證次數(shù)】32 【他引次數(shù)】3.0 【被自引次數(shù)】5.0 【被他引次數(shù)】27.0 【家族引證次數(shù)】12.0 【家族被引證次數(shù)】57

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