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【摘要】 本發(fā)明公開了一種利用幼胚拯救獲得百合屬遠(yuǎn)緣雜種的方法，它選擇云南野生百合及國(guó)內(nèi)外各類優(yōu)異親本，以東方百合雜種系為母本，進(jìn)行雜交，通過雜交授粉子房及幼胚的離體培養(yǎng)可在胚敗育之前將其取出培養(yǎng)，避免遠(yuǎn)緣雜種胚早衰，使大量遠(yuǎn)緣雜交胚繼續(xù)發(fā)育成正常種子，盡快進(jìn)入選育程序，縮短了育種周期，同時(shí)獲得了大量的遠(yuǎn)緣雜交后代，實(shí)現(xiàn)了百合屬種間遠(yuǎn)緣雜交，創(chuàng)造了一批新種質(zhì)，胚挽救技術(shù)與百合瓶?jī)?nèi)結(jié)球技術(shù)的結(jié)合，有效縮短了百合雜交后代的培育周期和雜種成活率。 【專利類型】發(fā)明申請(qǐng) 【申請(qǐng)人】云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院花卉研究所 【申請(qǐng)人類型】科研單位 【申請(qǐng)人地址】650205云南省昆明市北郊龍頭街云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院內(nèi) 【申請(qǐng)人地區(qū)】中國(guó) 【申請(qǐng)人城市】昆明市 【申請(qǐng)人區(qū)縣】官渡區(qū) 【申請(qǐng)?zhí)枴緾N200610048821.8 【申請(qǐng)日】2006-11-16 【申請(qǐng)年份】2006 【公開公告號(hào)】CN1994067A 【公開公告日】2007-07-11 【公開公告年份】2007 【授權(quán)公告號(hào)】CN100490636C 【授權(quán)公告日】2009-05-27 【授權(quán)公告年份】2009.0 【IPC分類號(hào)】A01H4/00; C12N5/04; A01N3/02; A01N3/00 【發(fā)明人】屈云慧; 熊麗; 蔣亞蓮; 吳學(xué)尉; 張藝萍 【主權(quán)項(xiàng)內(nèi)容】1、一種利用幼胚離體挽救培養(yǎng)獲得百合遠(yuǎn)緣雜種的方法，其特征在于 經(jīng)過以下步驟： A、將授粉后8-23天的受精子房切割下來，在2～6℃溫度條件下存放 8～15小時(shí)，用濃度為75％的酒精對(duì)其表面擦拭2-3次，再用濃度為75％的 酒精浸泡消毒1～2分鐘，然后在濃度為0.05～0.1％的升汞溶液中浸泡12～ 18分鐘，用無菌水洗2～3次，選取膨大的部位，將子房橫切為0.2cm的切 片； B、在無菌條件下，將滅菌后的子房切片接種到單位為mg/L的下列誘 導(dǎo)培養(yǎng)基中： MS基本培養(yǎng)液 萘乙酸(NAA)？？？？0.5～1.0mg/L 蔗糖？？？？？？？？？？？60000mg/L 瓊脂？？？？？？？？？？？6000mg/L pH？？？？？？？？？？？？？5.0～5.5 在光照8～10h/d，光強(qiáng)800～1200Lx，培養(yǎng)室溫度22～26℃條件下， 培養(yǎng)20～30d后，在解剖鏡下剝離膨大的胚珠； C、在與步驟B相同的培養(yǎng)條件下，對(duì)剝離的胚珠進(jìn)行單胚培養(yǎng)，培養(yǎng) 40～50天后幼胚萌發(fā)； D、將萌發(fā)的幼胚接種到單位為mg/L的下列增殖培養(yǎng)基中： MS基本培養(yǎng)液 6-芐基氨基嘌呤(6-BA)？？？0.5～1.0mg/L 萘乙酸(NAA)？？？？？？？？？？？？0～0.1mg/L 蔗糖？？？？？？？？？？？？？？？？？？？30000mg/L 瓊脂？？？？？？？？？？？？？？？？？？？6000mg/L pH？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？5.5～5.8 在光照10～12h/d，光強(qiáng)1000～1500Lx，培養(yǎng)室溫度22～26℃條件下 繼代培養(yǎng)，每15～20d繼代一次； E、繼代3次后，待每個(gè)單胚增殖到15～25株后，將其分離成單株， 切除葉片后接種到單位為mg/L的下列培養(yǎng)基中： MS基本培養(yǎng)液 萘乙酸(NAA)？？？？0～0.1mg/L 蔗糖？？？？？？？？？？？60000～90000mg/L 瓊脂？？？？？？？？？？？6000mg/L pH？？？？？？？？？？？？？5.5～5.8 在無光照，培養(yǎng)室溫度為22～26℃條件下，培養(yǎng)80～100d出瓶，包 裝后于2～4℃條件下放置60～90天，即可下地種植。 【當(dāng)前權(quán)利人】云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院花卉研究所 【當(dāng)前專利權(quán)人地址】云南省昆明市北郊龍頭街云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院內(nèi) 【統(tǒng)一社會(huì)信用代碼】12530000767095535N 【被引證次數(shù)】22 【被自引次數(shù)】2.0 【被他引次數(shù)】20.0 【家族引證次數(shù)】2.0 【家族被引證次數(shù)】22

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