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圓葉無心菜的組織培養(yǎng)方法

時間:2026-04-09    作者:admin 點(diǎn)擊: ( 1 ) 次

【摘要】 本發(fā)明是重金屬超累積植物圓葉無心菜的組織培養(yǎng)方法。該方法以圓葉無心菜的頂芽、嫩莖或葉片為外植體,通過不同組合的試驗(yàn)設(shè)計,篩選出了培養(yǎng)條件、愈傷組織誘導(dǎo)、分化芽誘導(dǎo)、分化芽生根、煉苗和移栽的最佳方法。通過反復(fù)實(shí)驗(yàn)得出:誘導(dǎo)愈傷組織的最佳培養(yǎng)基是Ms+6-BA0.2mg/L+NAA0.02mg/L;誘導(dǎo)分化芽的最佳培養(yǎng)基是Ms+6-BA1mg/L+NAA 0.1mg/L;誘導(dǎo)分化芽生根的最佳培養(yǎng)基是Ms+6-BA0.1mg/L+NAA0.5mg/L。培養(yǎng)溫度(25±2)℃,光照強(qiáng)度1600-2400lux,光照時間12/d,培養(yǎng)時間30天。在分化苗出瓶前打開瓶蓋,2天后用清水洗掉根上的培養(yǎng)基,再用1‰KMnO4溶液浸泡30s,栽到高溫滅菌的珍珠巖和沙土混合的基質(zhì)中,置于溫室中15天后,再移栽到土壤中。該方法可以通過組織培養(yǎng)方式快速繁殖圓葉無心菜的幼苗。 【專利類型】發(fā)明申請 【申請人】云南農(nóng)業(yè)大學(xué) 【申請人類型】學(xué)校 【申請人地址】650201云南省昆明市北郊黑龍?zhí)对颇限r(nóng)業(yè)大學(xué) 【申請人地區(qū)】中國 【申請人城市】昆明市 【申請?zhí)枴緾N200610011049.2 【申請日】2006-07-14 【申請年份】2006 【公開公告號】CN1887064A 【公開公告日】2007-01-03 【公開公告年份】2007 【授權(quán)公告號】CN100441092C 【授權(quán)公告日】2008-12-10 【授權(quán)公告年份】2008.0 【IPC分類號】A01H4/00; C12N5/04 【發(fā)明人】李元; 祖艷群 【主權(quán)項(xiàng)內(nèi)容】1、一種圓葉無心菜的組織培養(yǎng)方法,其步驟是: (1)圓葉無心菜外植體的選擇 以圓葉無心菜的頂芽、嫩莖和葉片為外植體; (2)圓葉無心菜愈傷組織的誘導(dǎo) 將圓葉無心菜的頂芽、嫩莖和葉片在自來水下沖洗10-20min后,在無菌條件下用70%的 酒精浸泡消毒30s,用10%NaOCl消毒8-10min,再用無菌水反復(fù)沖洗,切取0.4-0.6cm的小段, 接種到經(jīng)高壓滅菌培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷組織的誘導(dǎo);基本培養(yǎng)基選用MS培養(yǎng)基,附加細(xì)胞分裂 素6-BA0.1~0.8mg/L,生長NAA0.01~0.1mg/L;培養(yǎng)基pH值為5.8,蔗糖3%,瓊脂為7g/L;培 養(yǎng)溫度(25±2)℃,光照強(qiáng)度1600-2400lux,光照時間12/d,培養(yǎng)30天; (3)圓葉無心菜愈傷組織分化芽的誘導(dǎo) 將培養(yǎng)出的圓葉無心菜的愈傷組織在無菌條件下接種到經(jīng)高壓滅菌的培養(yǎng)基中進(jìn)行愈 傷組織分化芽的誘導(dǎo);基本培養(yǎng)基選用MS培養(yǎng)基,附加細(xì)胞分裂素6-BA0.5~2.0mg/L,生 長素NAA0.05~0.5mg/L;培養(yǎng)基pH值為5.8,蔗糖3%,瓊脂為7g/L;培養(yǎng)溫度(25±2)℃, 光照強(qiáng)度1600-2400lux,光照時間12/d,培養(yǎng)30天; (4)圓葉無心菜愈傷組織分化芽生根的誘導(dǎo) 將培養(yǎng)出的圓葉無心菜的愈傷組織分化芽在無菌條件下接種到經(jīng)高壓滅菌的培養(yǎng)基中 進(jìn)行愈傷組織分化芽生根的誘導(dǎo);基本培養(yǎng)基選用MS培養(yǎng)基,附加細(xì)胞分裂素6-BA0.05~ 0.5mg/L,生長素NAA0.2~2.0mg/L;培養(yǎng)基pH值為5.8,蔗糖3%,瓊脂為7g/L;培養(yǎng)溫度(25 ±2)℃,光照強(qiáng)度1600-2400lux,光照時間12/d,培養(yǎng)30天; (5)煉苗及移栽 在分化苗出瓶前2天保持瓶蓋半遮瓶口,2天后將小苗從瓶口取出,用清水洗凈根部的培 養(yǎng)基,再用1‰KMnO4溶液浸泡30s,濾干后栽到高溫滅菌的珍珠巖和沙土混合的基質(zhì)中,置 于溫室中15天后,再移栽到土壤中。 【當(dāng)前權(quán)利人】云南農(nóng)業(yè)大學(xué) 【當(dāng)前專利權(quán)人地址】云南省昆明市北郊黑龍?zhí)对颇限r(nóng)業(yè)大學(xué) 【專利權(quán)人類型】公立 【統(tǒng)一社會信用代碼】1253000043120331X7 【被引證次數(shù)】3 【被自引次數(shù)】1.0 【被他引次數(shù)】2.0 【家族被引證次數(shù)】3

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