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一種細(xì)菌莢膜多糖蛋白結(jié)合物中游離蛋白含量的測(cè)定方法

時(shí)間:2026-04-09    作者:admin 點(diǎn)擊: ( 0 ) 次

【摘要】 馬-克-數(shù)據(jù) 本發(fā)明一種細(xì)菌莢膜多糖蛋白結(jié)合物中游離蛋白含量的測(cè)定方法,屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。其內(nèi)容為先以Lowry法測(cè)定出待檢細(xì)菌莢膜多糖蛋白結(jié)合物中的載體蛋白濃度,然后取該待檢結(jié)合物對(duì)應(yīng)的載體蛋白作為樣1、該待檢結(jié)合物為樣2,用高效凝膠過(guò)濾色譜法分別測(cè)定樣1、樣2的色譜圖,利用外標(biāo)法計(jì)算游離蛋白含量。本發(fā)明能準(zhǔn)確、快速測(cè)定出細(xì)菌莢膜多糖-蛋白結(jié)合物中游離蛋白的含量,從而評(píng)價(jià)制品質(zhì)量。 【專(zhuān)利類(lèi)型】發(fā)明申請(qǐng) 【申請(qǐng)人】云南沃森生物技術(shù)有限公司 【申請(qǐng)人類(lèi)型】企業(yè) 【申請(qǐng)人地址】650106云南省昆明市高新區(qū)云南省大學(xué)科技園2期A3幢4樓 【申請(qǐng)人地區(qū)】中國(guó) 【申請(qǐng)人城市】昆明市 【申請(qǐng)?zhí)枴緾N200610163866.X 【申請(qǐng)日】2006-12-30 【申請(qǐng)年份】2006 【公開(kāi)公告號(hào)】CN101000351A 【公開(kāi)公告日】2007-07-18 【公開(kāi)公告年份】2007 【IPC分類(lèi)號(hào)】G01N33/68; G01N30/02; G01N1/38; G06F19/00; G06F19/10 【發(fā)明人】黃鎮(zhèn); 向左云; 吳凱 【主權(quán)項(xiàng)內(nèi)容】1、一種細(xì)菌莢膜多糖蛋白結(jié)合物中游離蛋白含量的測(cè)定方法,其步驟是: (1)利用Lowry法測(cè)定待檢細(xì)菌莢膜多糖蛋白結(jié)合物中的總載體蛋白濃度,為C0; (2)取待檢細(xì)菌莢膜多糖蛋白結(jié)合物對(duì)應(yīng)的載體蛋白溶液,根據(jù)其蛋白濃度,用生理 鹽水稀釋到50~1000μg/ml作為樣1,其最終濃度為C1; (3)取待檢細(xì)菌莢膜多糖蛋白結(jié)合物,作為樣2; (4)樣1、樣2分別上樣于用生理鹽水充分平衡的高效凝膠色譜柱,上樣體積20~200 μl,洗脫流速0.3~1.0ml/min,于波長(zhǎng)214nm記錄色譜圖;載體蛋白洗脫峰峰頂對(duì)應(yīng) 時(shí)間為t1、峰結(jié)束對(duì)應(yīng)時(shí)間為t2; (5)對(duì)樣1色譜圖進(jìn)行積分,調(diào)節(jié)積分窗口為從峰頂對(duì)應(yīng)時(shí)間t1到峰結(jié)束對(duì)應(yīng)時(shí)間t2 的后半峰,得到樣1的后半峰積分面積為S1; (6)對(duì)樣2色譜圖進(jìn)行積分,調(diào)節(jié)積分窗口為從峰頂對(duì)應(yīng)時(shí)間t1到峰結(jié)束對(duì)應(yīng)時(shí)間t2 的后半峰,得到樣2對(duì)應(yīng)游離蛋白的后半峰積分面積為S2; (7)根據(jù)公式: C2=(S2÷S1)×C1計(jì)算樣2中游離蛋白的濃度; (8)根據(jù)公式: F=(C2÷C0)×100%計(jì)算樣2中游離蛋白的百分含量。 【當(dāng)前權(quán)利人】云南沃森生物技術(shù)有限公司 【當(dāng)前專(zhuān)利權(quán)人地址】云南省昆明市高新區(qū)云南省大學(xué)科技園2期A3幢4樓 【被引證次數(shù)】8 【被自引次數(shù)】4.0 【被他引次數(shù)】4.0 【家族被引證次數(shù)】8

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