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一種肺炎鏈球菌莢膜多糖結合物中游離多糖含量的測定方法

時間:2026-04-09    作者:admin 點擊: ( 0 ) 次

【摘要】 本發(fā)明一種肺炎鏈球菌莢膜多糖結合物中游離 多糖含量的測定方法,屬于生物技術領域,其步驟為取肺炎鏈 球菌莢膜多糖結合物為樣1,另取等量肺炎鏈球菌莢膜多糖結 合物,加入無水乙醇和氯化鈉,置-20℃70~90小時,離心去 上清液;用適當溶劑充分洗滌沉淀,離心收集上清液,上清液 經(jīng)超濾脫鹽和乙醇后為樣2;以蒽酮法測定樣1、樣2的多糖 含量,計算出肺炎鏈球菌莢膜多糖結合物中的游離多糖含量。 本發(fā)明可準確、簡便地測定出肺炎鏈球菌莢膜多糖結合物中游 離多糖的含量。 【專利類型】發(fā)明申請 【申請人】云南沃森生物技術有限公司 【申請人類型】企業(yè) 【申請人地址】650106云南省昆明市云南省昆明市高新區(qū)云南省大學科技園2期A3幢4樓 【申請人地區(qū)】中國 【申請人城市】昆明市 【申請?zhí)枴緾N200610048877.3 【申請日】2006-12-06 【申請年份】2006 【公開公告號】CN1963500A 【公開公告日】2007-05-16 【公開公告年份】2007 【授權公告號】CN1963500B 【授權公告日】2010-05-12 【授權公告年份】2010.0 【IPC分類號】G01N31/00; G01N1/34; G01N33/00; C12Q1/00; G06F19/00 【發(fā)明人】黃鎮(zhèn); 吳凱 【主權項內(nèi)容】1、一種肺炎鏈球菌莢膜多糖結合物中游離多糖含量的測定方法,其步驟是: (1)取待測肺炎鏈球菌莢膜多糖結合物為樣1;待測肺炎鏈球菌莢膜多糖結合物對應的衍生物溶液為樣3; (2)另取肺炎鏈球菌莢膜多糖結合物4.5ml,置于50ml離心管中;取肺炎鏈球菌莢膜多糖結合物對應的衍生物溶液4.5ml,置于另一50ml離心管中;向每離心管加入5mol/L氯化鈉溶液1.125ml,振蕩混勻,再加入無水乙醇22.5ml,振蕩混勻,置-20℃70~90小時;于5℃、4500~6500rpm離心60~90分鐘,棄上清液; (3)向每離心管加入0.75ml?0~60%乙醇溶液,振蕩混合,室溫靜置1小時;然后再加入相同乙醇溶液2.25ml,振蕩混合,室溫靜置2小時;于15℃、4500~6500rpm離心40~60分鐘,每離心管單獨收集上清液; (4)將結合物上清液用3~100kD超濾杯超濾,收集超濾后液、超濾杯清洗液,并補加注射用水至3ml即為樣2;將對應衍生物上清液用3~100K超濾杯超濾,收集超濾后液、超濾杯清洗液,并補加注射用水至3ml即為樣4; (5)用蒽酮法測定樣1、樣2、樣3、樣4的多糖濃度,分別為A1、A2、A3、A4; (6)根據(jù)公式計算回收率P: ,回收率應在80-120%; (7)根據(jù)公式計算游離多糖含量H: ,式中P為回收率。 馬 克 數(shù) 據(jù) 網(wǎng) 【當前權利人】云南沃森生物技術股份有限公司 【當前專利權人地址】云南省昆明市高新區(qū)云南省大學科技園2期A3幢4樓 【被引證次數(shù)】2 【被他引次數(shù)】2.0 【家族引證次數(shù)】3.0 【家族被引證次數(shù)】4

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