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雙向電泳,雙向電泳槽

時間:2026-02-23    作者:admin 點擊: ( 1 ) 次

一:

雙向電泳技術(shù)百科

問題1:雙向電泳蛋白質(zhì)質(zhì)譜鑒定
雙向電泳答:你需要去問問幫你做實驗的那邊對樣品的要求。有的地方要求是樣品都處理好送過去,有的地方為了保證樣品處理的質(zhì)量,防止設備受損,會要求你把點從膠上扣下來,直接送過去,其他的酶解什么的后續(xù)處理都由他們來做。如果你們。

問題2:雙向電泳的挑戰(zhàn)
答:2-DE面臨的挑戰(zhàn)是高分辨率和重復性高分辨率確保蛋白最大程度的分離,高重復性允許進行凝膠間配比(match)對2-DE而言,有3種方法分離蛋白:1)ISO-DALT(isoelectricfocus)以O’Farrell’s技術(shù)為基礎第一向應用。

問題3:雙向電泳為什么不能檢測高分子量蛋白質(zhì)、酸性蛋白質(zhì)和堿性蛋白質(zhì)?_百
雙向電泳答:過高分子量蛋白無法在第一向管狀電泳中入膠,過酸或過堿蛋白會超出第二向等點聚焦電泳的分離范圍,直接跑出膠外。

問題4:雙向電泳為什么先進行等電聚焦再進行SDSPAGE?
答:SDSPAGE是根據(jù)蛋白分子量差異進行分離。SDSPAGE進行時,SDS會使蛋白質(zhì)變性,成為大小相似的棒錐狀;也會使蛋白表面攜帶大量的負電(帶電量與表面積有關(guān)),也就是說所有蛋白都是帶負電的且?guī)щ娏肯嘟?,用等電聚焦無法分離。

問題5:電泳法分離混合蛋白質(zhì)的基本原理是什么?
雙向電泳答:氨基酸混合物特別是寡聚核苷酸混合物一次電泳往往不能完全分開。這種情況可以將第一次電泳分開的斑點通過支持介質(zhì)間的接觸印跡轉(zhuǎn)移到第二個支持介質(zhì)上,旋轉(zhuǎn)90°,進行第二次電泳。這種方法稱為雙向電泳。聚丙烯酰胺凝膠電泳:以。

問題6:雙向電泳中樣品蛋白質(zhì)濃度要求?最好能具體說明!
雙向電泳答:要看樓主你所有的儀器和IEFstrip的要求吧?我用過的是這家公司的GEHealthcare。他們的蛋白質(zhì)濃度要求就寫在使用手冊里面。http://wwwgelifesciencescom/aptrix/upp01077nsf/Content/2d_electrophoresis~2d。

問題7:蛋白質(zhì)雙向電泳和單向電泳儀器一樣嗎
答:第一向是等點聚焦,根據(jù)不同的等電點將蛋白質(zhì)分離開;第二向是SDS-PAGE,根據(jù)蛋白質(zhì)分子量大小分離。常規(guī)的單向電泳只有SDS-PAGE。

問題8:雙向電泳中使用的SB3-10以及CA是什么東西?
答:3、溶解方法要保證樣品在電泳過程中保持溶解狀態(tài)。增加樣品溶解性的手段變性劑:通過改變?nèi)芤褐械臍滏I結(jié)構(gòu)使蛋白質(zhì)充分伸展,將其疏水中心完全暴露,降低接近疏水殘基的能量域。其典型代表是尿素和硫尿。表面活性劑:經(jīng)過變性劑。

問題9:蛋白質(zhì)組學中的雙向電泳和質(zhì)譜技術(shù)在纖維素酶中的應用主要在哪些方面
答:蛋白質(zhì)組學是一個分析的手段,主要目的是找出不同處理組之間的蛋白差異,不管是纖維素酶還是其他的樣品都是一個道理,找出差異的蛋白,并且通過質(zhì)譜鑒定該蛋白是什么蛋白。比如可以通過不同的處理看看其處理的方式對纖維素的。

問題10:雙向電泳水化液配方:8MUrea,1%DTT,2%CHAPS,05%微升兩性電解質(zhì)。配
雙向電泳答:urea就按照50mL中8M的濃度來算(分子量等)DTT和CHAPS一般是mM的濃度吧?如果是1%的話就應該按照100mL對應1g的標準來算了。

二:

雙向電泳技術(shù)資料

問題1:蛋白質(zhì)雙向電泳的原理是什么呀?
雙向電泳答:蛋白質(zhì)2維電泳1個方向是SDS-聚丙烯酰胺凝膠主要是把蛋白質(zhì)按照分子量分開1個方向是等點聚焦把蛋白質(zhì)按照等電點的不同分開這樣就可以把不同的蛋白質(zhì)盡可能的分開可以結(jié)合質(zhì)譜對細胞進行蛋白質(zhì)組的研究例如我們研究。

問題2:蛋白質(zhì)雙向電泳的基本原理及主要用途
雙向電泳答:蛋白質(zhì)2維電泳1個方向是SDS-聚丙烯酰胺凝膠主要是把蛋白質(zhì)按照分子量分開1個方向是等點聚焦把蛋白質(zhì)按照等電點的不同分開這樣就可以把不同的蛋白質(zhì)盡可能的分開可以結(jié)合質(zhì)譜對細胞進行蛋白質(zhì)組的研究例如我們研究。

問題3:如果通過雙向電泳篩選得到一個差異表達蛋白質(zhì),如何繼續(xù)研究該蛋白質(zhì)的
答:電泳儀的原理:帶電粒子在直流電場作用下于一定介質(zhì)中所發(fā)生的定向運動,利用這一現(xiàn)象對化學或生物化學組分進行分離分析的技術(shù)稱之為電泳。雙向電泳就是等電聚焦電泳和SDS-PAGE的組合。1先進行等電聚焦電泳(按照蛋白等電點。

問題4:PAGE一條帶,雙向電泳一個點,分子大小均一為什么?
答:SDS-PAGE:是變性膠,SDS的加入破壞了蛋白的空間結(jié)構(gòu),使得不同蛋白間只有分子量不同的差別,因此電泳后,同一條帶的蛋白應該是具有相同/接近的分子量雙向電泳(2D):可以根據(jù)蛋白的等電點和分子量進行2維電泳,一個點基本。

問題5:當利用雙向電泳技術(shù)找到差異點后用什么技術(shù)能夠克隆到目的基因?_百度
雙向電泳答:首先,蛋白測序,分析一級結(jié)構(gòu)翻譯成核酸序列,如果該物種已經(jīng)測序就可以在圖譜里面找,沒測序的話也行設計引物,PCR,核酸測序,和圖譜里面的或者和翻譯的那個序列比對,然后保存。

問題6:二維電泳和雙向電泳有區(qū)別嗎
答:一樣的。

問題7:通過雙向電泳分離出一個新蛋白,如何探討它的功能?
答:aa測序→到數(shù)據(jù)庫上BLAST→預測結(jié)構(gòu)功能,蛋白的性質(zhì),胞外還是胞內(nèi)還是膜蛋白,相似序列相似蛋白,預測蛋白間相互作用,總之先通過數(shù)據(jù)庫做大量的預測工作,好幾周甚至上月,然后釣出基因做功能實驗、雙雜交或pulldown,coip。

問題8:雙向電泳之后的染色方法有幾種?EB,考染,還有ECL染色等等各自的優(yōu)缺點能
答:由于各種染色方法靈敏度的不同并且不同類型的蛋白質(zhì)對不同的染色方法有特異性,所以各種染色方法都有優(yōu)缺點。銀染或者熒光染色的靈敏度相對考染來說要高:且熒光染色可不使核酸顯示,背景低(高信噪比),質(zhì)譜匹配,需與能。

問題9:雙向電泳兩次次序可以顛倒嗎
雙向電泳答:不行。

問題10:為什么蛋白雙向電泳時蛋白點總是跑不開?
答:時間太短,你的蛋白可能與別人的不同,比如一個孩子和一個壯年跑十米分出高下,但是兩個身體素質(zhì)差不多的壯年可能跑20圈才見高下。蛋白也一樣,分子量、帶電啊,如果差別很小,當然要膠緊密點,跑長點。

三 :

雙向電泳名企推薦

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